- 细胞生物学(全国中医药行业高等教育“十四五”规划教材)
- 赵宗江 高碧珍主编
- 489字
- 2023-08-15 18:20:42
一、酶细胞化学技术
酶(enzyme)是一种生物体内高效催化各种化学反应的特异性生物催化剂,主要由蛋白质构成。生命活动离不开酶的催化作用,通过酶的催化作用调节机体内物质代谢有条不紊地进行。酶促反应具有高效性、高度特异性及可调节性。细胞内有很多酶,它们在细胞内的分布都有其特定部位。
酶细胞化学技术(enzyme cytochemistry)就是用组织化学的分析方法证明组织细胞中酶的存在,研究酶的定性、定位和定量的一种技术。自Klebs于1868年首次采用这一方法显示组织中的过氧化物酶以来,已近150年的历史,至今能用此技术显示的酶有200多种,已广泛应用于组织细胞代谢、细胞类型判定、细胞定位等研究。早期的酶细胞化学工作是在光学显微镜上进行的,称为酶组织化学(enzyme histochemistry)。自20世纪60年代开始用电镜观察酶的分布,称电镜酶细胞化学(electron microscopic enzyme cytochemistry)。
酶组织化学反应主要经过酶促反应和显色反应两步。操作时将具有酶活性的组织切片或细胞涂片放入含有相应酶作用底物和辅助剂并具有所需pH值的孵育液中,在适宜温度下进行孵育反应。根据酶催化反应的性质,可将酶细胞化学反应分为水解酶、氧化还原酶、裂解酶、合成酶和异构酶六大类,电镜酶细胞化学中应用较多的是水解酶和氧化还原酶等。